血液組織DNA提取試劑盒（DNeasy Blood & Tissue Kit）技術簡介
從動物血液和組織、細胞、酵母、細菌或者病毒中純化總DNA
1.為各種類型樣本提供標準化的純化方法
2．即使是特殊類型起始樣本也可以獲得高產量DNA
3．高品質DNA
4．經過優化的操作方法適合處理多種起始樣本
5．可選擇離心柱方式或96孔板高通量方式
DNeasy Blood & Tissue Kit采用基于硅膠膜技術的離心柱或96孔板方式快速方便的純化DNA。大多數樣本可直接用蛋白酶K消化處理，無需機械破碎，減少了手動操作時間。為特殊樣本提供優化的純化方法，獲得高重復性、高純度的DNA，用于生物研究、基因型分析和獸醫病理研究。DNA純化流程可以使用DNeasy Blood & Tissue Kit，在QIAcube全自動核酸純化儀上自動化進行。
詳細信息：
性能
高效的DNeasy Blood & Tissue操作流程能夠從動物血液和組織樣本中純化大量的總DNA。優化的實驗方案可確保非標準樣本的高產量，如動物毛發和培養細胞、固定的組織，或者革蘭氏陽性和陰性細菌。獨特的在線實驗方案參考文庫，可從酵母、昆蟲、毛發和其他類型樣本中純化DNA。
使用DNeasy Blood & Tissue Kits從動物組織中純化的DNA產量
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樣本來源 |
樣本量 |
DNA（μg） |
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哺乳動物血液 |
100 μl |
3–6 |
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鳥類血液 |
5 μl |
9–40 |
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HeLa細胞 |
2 x 106 |
15–25 |
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肝臟 |
25 mg |
10–30 |
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腦 |
25 mg |
15–30 |
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腎臟 |
25 mg |
15–30 |
|
脾臟 |
10 mg |
5–30 |
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小鼠尾 |
1.2 cm（尾部） |
10–25 |
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大鼠尾 |
0.6 cm（尾部） |
20–40 |
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豬耳 |
25 mg |
10–30 |
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馬毛 |
10 根毛發 |
2–4 |
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魚鰭 |
20 mg |
10–20 |
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魚卵（鯖魚） |
10 mg |
5–10 |
DNeasy Blood & Tissue Kits簡化了從多種樣本類型中純化DNA的流程，包括在生命科學、獸醫學和基因分型研究應用中常見的動物種類。純化得到的DNA不含PCR抑制劑，能在標準多重real-time PCR中進行靈敏的檢測。DNeasy Blood & Tissue Kits確保了可靠的實驗結果，從轉基因小鼠的實驗室分析到家畜的育種項目和種系基因分型研究。可以用DNeasy 96 Blood & Tissue Kit方便地擴大常規的檢測應用的規模。
原理
DNeasy Blood & Tissue Kit適用于從不同的樣本中，包括新鮮或冷凍的動物組織和細胞、血液或者細菌，快速純化總DNA（如，基因組、線粒體和病原體等）。
DNeasy膜整合了硅膠膜的結合特性，經簡單顯微離心技術或者QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System處理即可。在高濃度離液鹽的環境中，DNA吸附在DNeasy膜上，可以除去溶液中水合分子的水分。DNeasy Blood & Tissue操作流程中設計的緩沖液條件，旨在使DNA特異性吸附到硅膠膜上，并且優化去除污染物和酶抑制劑。
純化過程不需要苯酚或氯仿抽提或乙醇沉淀，僅涉及少量手工步驟。這使得DNeasy Blood & Tissue Kits非常適合同時處理多個樣本。對于高通量的應用，DNeasy 96 Blood & Tissue Kit能夠同時處理96或192個樣本。
操作流程
可靠的硅膠膜技術，利用便捷的離心柱或96孔板形式，確保了快速可重復的DNA純化，不再需要有機抽提和乙醇沉淀（參見DNeasy Mini and 96 procedures）。樣本首先用蛋白酶K裂解。調整緩沖條件，以提供最佳的DNA結合條件并將裂解物上樣到DNeasy Mini離心柱或DNeasy 96孔板上。在離心過程中，DNA選擇性地結合到DNeasy膜上，污染物通過。余下的污染物和酶抑制劑將在兩個高效的洗滌步驟中被去除。然后，用水或緩沖液將DNA洗脫，待用。
DNeasy Mini離心柱預裝在收集管中，并且單獨封存，確保方便和安全。使用DNeasy Mini離心柱的純化過程可在QIAcube全自動核酸純化儀上自動進行。DNeasy 96 Blood & Tissue Kit可使用QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System以96孔板形式進行高通量處理。
應用
DNeasy Blood & Tissue Kits提供高品質DNA，可直接用于多種下游分析，包括：
1．生命科學研究
2．家畜育種
3．種系基因分型研究
4．獸醫病理分析研究
5．常規的應用檢測
技術參數：
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特點 |
參數 |
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Applications |
PCR, real-time PCR, genotyping |
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Elution volume |
100–200 μl |
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Format |
96-well plate, spin column |
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Main sample type |
Blood, tissue |
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Processing |
Manual |
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Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein |
DNA |
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Sample amount |
100 μl/25 mg |
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Technology |
Silica technology |
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Time per run or per prep |
20 minutes – 1 hour |
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Yield |
6 μg/30 μg |
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